引加生物(wù)的重组T4 RNA 连接酶2（突变體(tǐ)）是在大肠杆菌中(zhōng)重组表达，并引入了K227Q突变的截短型的T4 RNA 连接酶2。该连接酶可(kě)特异性地将DNA 或 RNA 的预腺苷酰化的 5’ 末端连接到 RNA 的 3’OH 末端。 该酶在连接过程中(zhōng)不消耗 ATP，但需要预腺苷酰化的接头开启反应。K227Q突变后大大降低了该酶原本所含有(yǒu)的轻微的从5’预腺苷酰化的DNA接头 (AppDNA) 将腺苷基团转移到 RNA 5’磷酸基团的同时形成 5’磷酸化DNA接头 (pDNA) 的活性，从而减少了RNA的非特异性连接，例如RNA串联或自连成环。另外，该酶只能(néng)利用(yòng)5’端预腺苷酰化的单链DNA或RNA作(zuò)為(wèi)3’端接头，不消耗ATP，可(kě)大大降低连接反应的背景，通常是克隆microRNA或建库时的优先选择。此外，65℃热处理(lǐ)20分(fēn)钟可(kě)使该酶失去活性。

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