T4 DNA聚合酶对5´→3´方向的DNA合成起到催化作(zuò)用(yòng)，需要使用(yòng)模板和引物(wù)。该酶具(jù)有(yǒu)3´→5´核酸外切酶活性，比DNA聚合酶I（E. coli）中(zhōng)发现的活性高得多(duō)。与DNA聚合酶I（E. coli）不同，T4 DNA聚合酶不具(jù)有(yǒu)5´→3´核酸外切酶功能(néng)。

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